DOSP-VHR-002943 | Next Generation Cryoprotectants

Dit project bouwt verder op het lopende onderzoek dat gebaseerd is op de originele aanvraag van PWO Cryostress en de uitbreiding IOF-POC Create Cryostress.

In deze projectaanvragen werden volgende onderzoeksvragen geformuleerd: a. Kunnen we Design of Experiments gebruiken om multifactoriële optimalisaties van biologisch materiaal uit te voeren? b. Welke factoren zijn van grote impact op de opbrengst van het cryopreservatieprotocol van verschillende celtypes?

De onderzoeksvragen worden in dit project verder uitgebreid en genuanceerd met: c. Kan een duurzamer of gezonder alternatief voor DMSO gevonden worden als cryoprotectans (vb. het gebruik van NADES met cryoprotectante eigenschappen)?

Hoewel DMSO een wijdverspreid en veel gebruikt cryoprotectans is, werd reeds aangetoond dat het toedienen van DMSO aan mensen die gebruik maken van cryopreservatie voor medische behandelingen kan leiden tot adverse events en toxiciteit. Een duurzaam alternatief zonder bijwerkingen kan hiervoor een oplossing zijn.

NADES, natural deep eutectic systems, zijn gebaseerd op natuurlijke suikers en metabolieten die reeds voorkomen in het menselijk lichaam, waardoor de tolerantie sterk verhoogd kan zijn.

NADES worden gesynthetiseerd en geëvalueerd op hun cryoprotectante activiteit met behulp van de IceCube® die werd aangekocht op het PWO project Cryostress. De IceCube® is in staat om een invriescurve te produceren die kan vergeleken worden met gekende chemische cryoprotectanten.

De toxiciteit van de NADES wordt geëvalueerd met behulp van eenvoudige viabiliteitstesten na blootstelling, waardoor een IC50 geformuleerd kan worden. Op basis van deze informatie wordt dan een experimenteel design opgesteld.

De resultaten van deze experimenten brengen het potentieel van het gebruik van de NADES in kaart voor het invriezen en bewaren van humane cellen.

De beoogde onderzoeksoutput is de ontwikkeling van een geoptimaliseerd cryopreservatieprotocol. Hierbij worden alternatieve cryoprotectanten gebruikt, maar moet minstens eenzelfde opbrengst behouden blijven na een vries-dooi cyclus.